Este nuevo capítulo de la saga épica lleva la acción a un nuevo campo de batalla, en el mar, mientras el general griego Themistokles intenta unir toda Grecia liderando la carga que cambiará el curso de la guerra. "300: El Nacimiento de un Imperio" enfrenta a Themistokles contra las masivas fuerzas invasoras persas lideradas por el mortal convertido en dios Xerxes y Artemesia, el vengativo comandante de la armada persa.